动植物/菌种GFP表达观察常见问题解答

动植物/菌种GFP表达观察常见问题解答

时间:2019-7-9 编辑:SunLonge

1. 如何观察动物植物表达GFP
首先要选择光线比较暗的环境,佩戴观察眼罩,采用深圳荧鸿荧光蛋白观察镜照射要观察的植株,GFP表达位置即可清晰呈现。

2.观察到的GFP表达位置如何拍照?
要拍照植物GFP表达的位置,首先要有一台单反相机,安装植物拍照滤镜,路径和镜头要是对应的,如果不对应可在市场上购买滤镜安装转换卡,用荧光蛋白观察镜照射植物,用装有滤镜的单反相机直接拍照就行了,切记要关闭照相机闪光功能。

3. 用荧光蛋白观察镜需要把植物叶片采下来观察吗?
便携式荧光蛋白观察镜可采用内置有充电电池式,即开即用,可以直接带入到试验田里面观察, 无需采摘叶片,如果试验田光线太亮,需要做隔光处理。

4.  365nm、450nm、488nm 用哪个波段最适合观察GFP荧光蛋白?
这几个波段都能激发GFP和EGFP出现荧光,365nm激发的比较弱,488nm激发的荧光最强,但488nm的激发波长太接近发射波长520nm,激发光和发射光距离太近对观察眼镜要求太高,观察眼镜很难把发射光隔离掉,会严重干扰发射的荧光。所以用450nm的蓝光激发光是最理想的。

5.  365nm的紫外光源照射植物叶片为什么是红色和黄色?
365nm的紫外光源照射植物叶片,叶片的叶绿素在紫外线作用下会发红光,GFP发出的是绿色的荧光,红色和绿色混在一起,会变成黄色,所有,用紫外光源照射叶片上黄色部位有可能就是GFP表达的位置。

6. 深圳荧鸿荧光蛋白观察镜主要有哪些应用?
1)检测转绿色荧光蛋白(GFP)基因、红色荧光蛋白(DsRed)基因植物:水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、拟南芥等;
2)检测转GFP、DsRed基因动物:小鼠、兔子、猴子等;
3)检测转GFP、DsRed基因微生物:细菌、真菌、酵母等;
4)检测GFP、DsRed基因组织特异性表达

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