如何用荧光显微镜观察GFP蛋白

如何用荧光显微镜观察GFP蛋白

时间:2019-7-15 编辑:SunLonge

荧光显微镜观察GFP蛋白研究动植物方便简单,被众多学校、研究所广泛使用,如何使用荧光显微镜观察GFP蛋白也成为初次使用荧光显微镜必须掌握的一个知识点:

(1)打开荧光显微镜灯源,超高压汞灯要预热15min才能达到最亮点(不同厂家的时间会有所不同),LED灯源则不需要预热

(2)透射式荧光显微镜需在光源与暗视野聚光器之间装上所要求的激发滤片,在物镜的后面装上相应的压制滤片。落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激发滤片、双色束分离器、压制滤片的插块。
(3)用低倍镜观察,根据不同型号荧光显微镜的调节装置,调整光源中心,使其位于整个照明光斑的中央。
(4)放置GFP标本片,调焦后即可观察。使用中应注意:未装滤光片不要用眼直接观察,以免引起眼的损伤;用油镜观察标本时,必须用无荧光的特殊镜油;高压汞灯关闭后不能立即重新打开,需待汞灯完全冷却后才能再启动,否则会不稳定,影响汞灯寿命,LED灯源的则可随关随开

(5)观察。例如:在荧光显微镜下用蓝紫光滤光片,观察到经0.01%吖啶橙荧光染料染色的细胞,细胞核和细胞质被激发产生两种不同颜色的荧光(暗绿色和橙红色)

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