实验室检查灯激发光源研究植物GFP发光

绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）在收到紫光外或者蓝光激发时，发射绿色荧光，可在各种异源细胞，如细菌/昆虫以及植物细胞中表达，在植物研究中，通常需要各种显微镜来确定该基因是否表达，偶尔也会因为植物自发荧光导致假阳性的误判。

观察GFP发光可用深圳荧鸿实验室蓝光手电筒ULV450，紫外线激发光源SL8300，显微镜荧光激发光源SL169照射植物，同时需要佩戴专用的荧光观察眼镜,使用遮光片观察效果更佳。GFP荧光反应用荧光显微镜甚至肉眼就可以观察到，且灵敏度高，对于单细胞水平的表达也可识别。

绿色荧光蛋白在紫外线的激发下发光

GFP是从水母分离出的一种天然荧光蛋白，分子量约27000。为一个由238个氨基酸残基组成的单链多肽，其荧光发射峰在509nm，最大激发波长为395 nm，并在470 nm处有一肩峰，GFP的化学性质相当稳定，其变性需在90℃或pH<4．0或pH>12．0的条件下用6mol／L盐酸胍处理。GFP的荧光发光有两个明显的吸收带，对应于GFP的两种不同构象的基态A和B。基态A对应于395nm的吸收峰，基态B对应于475nm的吸收峰，基态A占优势，基态B的分子数量约是基态A的1／6，两种基态间能缓慢地转换，但激发态A 之间的转换很快且发生了质子转移，A 快速高效地衰变至另一激发态，应该存在一个中间过度态I，质子转移使A 转变成I ，I 回迁到基态I时产生发射峰504nm的荧光，构象改变使I 转变成B ，由B到B发射荧光而不发生质子转移。目前，对于GFP的作用机理较为认同的仅仅是：GFP是生物发光过程中的能量受体，并且是最终的发光体，不同的生物发光机制各不相同，不同的突变体发光机制也有很大差异。