实验室检查灯激发光源研究植物GFP发光

实验室检查灯激发光源研究植物GFP发光

时间:2018-12-27 编辑:荧鸿科技

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)在收到紫光外或者蓝光激发时,发射绿色荧光,可在各种异源细胞,如细菌/昆虫以及植物细胞中表达,在植物研究中,通常需要各种显微镜来确定该基因是否表达,偶尔也会因为植物自发荧光导致假阳性的误判。

观察GFP发光可用深圳荧鸿实验室蓝光手电筒ULV450紫外线激发光源SL8300显微镜荧光激发光源SL169照射植物,同时需要佩戴专用的荧光观察眼镜,使用遮光片观察效果更佳。GFP荧光反应用荧光显微镜甚至肉眼就可以观察到,且灵敏度高,对于单细胞水平的表达也可识别。

 

绿色荧光蛋白在紫外线的激发下发光

绿色荧光蛋白在紫外线的激发下发光

GFP是从水母分离出的一种天然荧光蛋白,分子量约27000。为一个由238个氨基酸残基组成的单链多肽,其荧光发射峰在509nm,最大激发波长为395 nm,并在470 nm处有一肩峰,GFP的化学性质相当稳定,其变性需在90℃或pH<4.0或pH>12.0的条件下用6mol/L盐酸胍处理。GFP的荧光发光有两个明显的吸收带,对应于GFP的两种不同构象的基态A和B。基态A对应于395nm的吸收峰,基态B对应于475nm的吸收峰,基态A占优势,基态B的分子数量约是基态A的1/6,两种基态间能缓慢地转换,但激发态A 之间的转换很快且发生了质子转移,A 快速高效地衰变至另一激发态,应该存在一个中间过度态I,质子转移使A 转变成I ,I 回迁到基态I时产生发射峰504nm的荧光,构象改变使I 转变成B ,由B到B发射荧光而不发生质子转移。目前,对于GFP的作用机理较为认同的仅仅是:GFP是生物发光过程中的能量受体,并且是最终的发光体,不同的生物发光机制各不相同,不同的突变体发光机制也有很大差异。

红色荧光蛋白在紫外线的激发下发光

红色荧光蛋白在紫外线的激发下发光

除此之外,深圳荧鸿实验室灯还可以用做以下用途:

1、 野外、实验室原位测定GFP(绿色荧光蛋白)。

2、 应用于转基因作物研究。

3、 区别可遗传性改良生物体和不可遗传的改良生物体。

4、 用于基因表达的研究。

5、 用于Rhodamine(红色荧光染料)、叶绿素、荧光素的研究。

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